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细菌内毒素试验凝胶定性法与动态浊度定量法的比较
2013-06-20 10:50:51 益择发布杨晨曦1
[摘要] 目的：对细菌内毒素运用凝胶定性法和动态浊度定量法的检查进行比较。为血站提供在原辅材料
内毒素检测时更适合的方法。方法：用鲎试剂凝胶定性法分别做灵敏度复核、干扰试验、供试品的检测，方法用药
典规定的生物制品细菌内毒素试验规程。动态浊度定量法分别做标准曲线检验试剂的灵敏度、回收率判断干扰
试验、供试品的检测．方法药典规定仪器试验。结果：动态浊度定量法结果易保存，在临界状态下，更容易进行结
果的判断。结论：血站在进行细菌内毒素检测时，最好选用定量法。
[关键词]细菌内毒素；凝胶法；动态浊度法；鲎试剂
[中图分类号]R 378 [文献标志码]A [文章编号]1004—2806(2010)06—0366—03
内毒素是革兰阴性杆菌细胞内的一种耐热脂
多糖，它的污染性强，而且稳定。为了从源头上控
制血液污染，对采血使用的原辅材料按照《血站质
量管理规范要求》必需进行检测。作者运用凝胶
定性法和动态浊度定量法检测比较报告如下。
1材料与方法
1．1凝胶法材料和试剂
血液保存液Ⅱ，红细胞添加剂，37℃水浴箱，
漩涡振荡仪，无菌安瓶，湛江安度斯生产；鲎试剂
灵敏度0．25 EU／ml，细菌内毒素工作标准品，无
菌检查用水。
1．2动态浊度法材料和试剂
血液保存液Ⅱ，红细胞添加剂，漩涡振荡仪，
ET一24A细菌内毒素检测仪，天津天大开发公司生
产；鲎试剂盒，湛江博康海洋生物有限公司生产。
1．3方法
1．3．1凝胶法方法鲎试剂灵敏度复核：用湛江
安度斯生产的细菌内毒素工作标准品，按照生物
制品细菌内毒素试验操作规程2．1(《中国药品检
验标准操作规程>>2005年)进行操作；供试品干扰
试验：用血液保存液Ⅱ，按照生物制品细菌内毒素
试验操作规程2．2(《中国药品检验标准操作规程》
2005年)进行操作；供试品内毒素检测：试验直接
用0．1ml试剂瓶进行操作，方法严格按照试剂说
明书操作。
1．3．2动态浊度方法标准曲线制作：首先将标
准品溶解稀释成2．0 EU／ml、1．0 EU／ml、0．5
EU／ml、0．125 EU／ml，加样按照试剂说明书操作。
加样完毕封口安瓶，将试管在漩涡仪上振荡1～3
s，将安瓶对应插入已经恒温的定量检测仪37℃，
仪器自动采集数据。
1泰安市红十字会中心血站(山东泰安，271000)
1．3．3供试品干扰试验用回收率判断按照所得
线性回归方程分别计算供试品溶液和含标准内毒
素的供试品的溶液的内毒素含量Ct和Cs，再按下
式计算该试验条件下的回收率(R) R=(Cs-
Ct)／km×100％当内毒素的回收率在50％～
100％之间，则认为在此该试验条件下供试品溶液
不存在干扰作用。
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