组织工程材料捕获成体干细胞的 影响因素研究
2013-03-13 14:30:42 益择发布影响因素研究
丁宁,王世立,韩金祥,张翠,葛鲁娜
【摘要】
目的 探索体内埋植组织工程材料方法获取成体干细胞的
相关影响因素。
方法BALB/c 小鼠随机分为 2 组,分别埋植经环氧乙烷
灭菌的明胶海绵与聚乳酸,在植入后第 3、7、14 天时分别
取出材料,HE 染色观察细胞捕获情况。将埋植相同质量明
胶海绵的小鼠随机分为成骨蛋白-1(OP-1)组、粒细胞集落
刺激因子(G-CSF)组和对照组,在植入后第 3、6、9、12、
15 天时分别取出材料,称取质量并进行细胞计数,采用流
式细胞术检测第 12 天时分离获得的各组细胞表面 CD34
和干细胞抗原-1(Sca-1)的阳性表达率。另取第 12 天时
分离获得的对照组细胞,分为 OP-1 组、G-CSF 组和空白
对照组,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。
结果HE 染色显示,明胶海绵与聚乳酸捕获的细胞数量均
随时间延长而增加。各组植入的明胶海绵质量均随时间延长
而减少,而捕获细胞数量均随时间延长而增加,OP-1 组第
9、12、15 天和 G-CSF 组第 9 天时捕获细胞数量分别与
对照组相比均有统计学意义(均 P < 0.05);OP-1 组细胞表
面 CD34、Sca-1 单阳性表达率和双阳性表达率(分别为
13.07% ± 0.19%、3.98% ± 0.15%、17.02% ± 0.12%)均明显
高于对照组(分别为 11.62% ± 0.44%、3.03% ± 0.11%、2.91%
± 0.14%,均 P < 0.05),G-CSF 组细胞表面 CD34、Sca-1 单
阳性表达率(分别为 12.79% ± 0.39%、4.52% ± 0.35%)分
别与对照组相比均无统计学意义,但双阳性表达率(10.21%
± 0.15%)与对照组相比有统计学意义(P < 0.05)。MTT 检
测结果显示,OP-1 组和 G-CSF 组各时间点测定的吸光度
值均高于空白对照组(均 P < 0.05)。
结论通过体内埋植复合 OP-1 明胶海绵的方法可增加干
细胞的捕获数量,为建立一种简易提取自体干细胞的新方法
奠定了基础。
【关键词】成体干细胞; 明胶海绵,吸收性; 骨形
态发生蛋白质类; 粒细胞集落刺激因子
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